產(chǎn)品詳情
知益科技采用均一聚合物微球制備和表面修飾技術(shù)規(guī)模化生產(chǎn)離子交換層析介質(zhì)。知益科技的離子交換層析介質(zhì)是以高度交聯(lián)的均一聚丙烯酸酯微球?yàn)榛|(zhì),與傳統(tǒng)的多糖基質(zhì)填料相比,知益科技的層析介質(zhì)具有剛性強(qiáng)、耐酸堿、反壓低、分辨率高、操作流速高等優(yōu)勢(shì)。知益科技的離子交換層析介質(zhì)有兩種不同的系列選擇,是分離純化蛋白、寡聚核苷酸、多肽和寡聚糖等生物分子的理想分離介質(zhì)。
KBsphere® 系列離子交換層析介質(zhì)是以高度交聯(lián)的均一聚丙烯酸酯微球表面形成一層親水性的涂層,親水性涂層的表面進(jìn)一步通過(guò)共價(jià)化學(xué)鍵引入離子交換功能基團(tuán)。親水性的涂層消除了固定相對(duì)生物分子的非特異性吸附,同時(shí)還減少了固定相對(duì)生物分子的空間位阻效應(yīng),從而提高了被分離物質(zhì)的分辨率和回收率。
KBsphere® M系列離子交換層析介質(zhì)是以高度交聯(lián)的均一聚丙烯酸酯微球?yàn)榛|(zhì),在微球表面直接鍵合離子交換功能基團(tuán),同時(shí)包含疏水和離子交換的雙重模式,具有對(duì)目標(biāo)分子更高的選擇性。
離子交換層析介質(zhì)的特點(diǎn):
· 球形,粒徑高度均一
· 化學(xué)穩(wěn)定性高和寬pH值范圍(pH=1-14)
· 優(yōu)化的孔徑結(jié)構(gòu)和表面修飾技術(shù)
· 機(jī)械強(qiáng)度高
· 低反壓、柱效高
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離子交換層析技術(shù)在大多數(shù)多步驟分離純化過(guò)程中扮演著重要而又高度靈活的角色。根據(jù)特定應(yīng)用中需要的不同,離子交換層析可用于目標(biāo)分子的粗提、中間步驟純化和精細(xì)純化。由于離子交換層析可提供不同的選擇性(如陽(yáng)離子/陰離子交換填料),且可通過(guò)調(diào)整純化過(guò)程的pH來(lái)改變樣品組分的帶電特性,因此在同一純化流程中可多次使用該技術(shù)。
知益科技可以提供不同類(lèi)型、粒徑可任意選擇的均一離子交換層析介質(zhì),可以滿(mǎn)足從粗提、中間步驟純化到精細(xì)純化全過(guò)程的需求。
粒徑高度均一
知益科技的離子交換層析介質(zhì)是以高度交聯(lián)的聚丙烯酸酯為基質(zhì),有高度均一的粒徑和孔徑結(jié)構(gòu),具有分辨率高、低反壓和柱效高等特點(diǎn)。
圖2. 離子交換層析介質(zhì)的掃描電鏡圖
機(jī)械強(qiáng)度高、耐反壓性能高
知益科技的離子交換層析介質(zhì)是以高度交聯(lián)的聚丙烯酸酯為基質(zhì),與傳統(tǒng)的瓊脂糖為基質(zhì)的離子交換填料相比,有良好的機(jī)械強(qiáng)度,在高流速和增加壓力的情況下,柱體積幾乎沒(méi)有變化,具有耐反壓性能高,大大地提高了分離效率。
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化學(xué)穩(wěn)定性高
知益科技的系列離子交換層析介質(zhì)以高交聯(lián)的聚丙烯酸酯微球?yàn)榛|(zhì),其在pH從1-14范圍內(nèi)都能保持良好的穩(wěn)定性。知益科技的離子交換層析介質(zhì)用1.0 mol/L NaOH溶液侵泡30天后,對(duì)胰島素的動(dòng)態(tài)吸附載量幾乎保持不變。
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離子交換層析介質(zhì)的應(yīng)用
Column: |
4.6 mm I.D. × 50 mm, KBsphere® 50DEAE |
Sample |
1. Transferrin, 2. Ovalbumin, 3. Trypsin inhibitor |
Phase A : |
50 mmol/L Tris-HCl + 1.0 mol/L NaCl, pH 8.5 |
Gradient: |
120 min, Phase A |
Flow Rate: |
1 ml/min |
Detection: |
AKTA Purifier (UV@ 280nm) |
圖5. KBsphere® 50DEAE離子交換層析介質(zhì)的應(yīng)用
Column: |
4.6 mm I.D. × 50 mm, KBsphere® 50SP |
Sample |
1. Ribonucleose A, 2. Cytochrome C, 3. Lysozyme |
Phase A: |
20% Na2HPO4, pH 6.8 |
Phase B: |
20% Na2HPO4, pH 6.8 + 1.0 M NaCl |
Gradient: |
Phase A in 2 CV, Phase B in 10 CV |
Flow Rate: |
1 ml/min |
Detection: |
AKTA Purifier (UV@ 280nm) |
圖6. 知益科技與品牌的離子交換層析介質(zhì)的分離效果比較
表1: KBsphere®系列離子交換層析介質(zhì)技術(shù)參數(shù)
型 號(hào) |
KBsphere® Q |
KBsphere® SP |
KBsphere® DEAE |
KBsphere® CM |
離子交換類(lèi)型 |
強(qiáng)陰離子 |
強(qiáng)陽(yáng)離子 |
弱陰離子 |
弱陽(yáng)離子 |
基質(zhì) |
聚丙烯酸酯 |
聚丙烯酸酯 |
聚丙烯酸酯 |
聚丙烯酸酯 |
官能團(tuán) |
-N+(CH3)3 |
-SO3 - |
-HN(C2H5)2 |
-CH2COO- |
總離子載量 (meq/ml) |
0.36-0.40 |
0.40-0.46 |
0.20-0.25 |
0.23-0.28 |
顆粒大小 (μm) |
30, 40, 50, 100 |
30, 40, 50, 100 |
30, 40, 50, 100 |
30, 40, 50, 100 |
可選孔徑(Å) |
500, 800 |
500, 800 |
500, 800 |
500, 800 |
儲(chǔ)存 |
20%乙醇 |
20%乙醇 |
20%乙醇 |
20%乙醇 |
動(dòng)態(tài)載量 |
50-80 mg BSA/ml |
40-70 mg Lysozyme/ml |
30-60 mg BSA/ml |
30-60 mg Lysozyme/ml |
化學(xué)穩(wěn)定性 |
適用于常規(guī)有機(jī)相(乙腈、乙醇等)、緩沖鹽體系(磷酸、Tris、醋酸體系等) 可用0.5 M HCl、0.5 M NaOH清洗 |
|||
pH穩(wěn)定性 |
1~14 |
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再生 |
1-2 M NaCl |
|||
高壓(121℃) |
可以 |
表2: 離子交換層析介質(zhì)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱(chēng) |
粒徑(μm) |
功能基團(tuán) |
孔徑(Å) |
KBsphere® SP |
30, 40, 50 |
-(CH2)3SO3- |
500, 800 |
KBsphere® CM |
30, 40, 50 |
-(CH2)3COO- |
500, 800 |
KBsphere® Q |
30, 40, 50 |
-(CH2)3N+(CH3)3 |
500, 800 |
KBsphere® DEAE |
30, 40, 50 |
-(CH2)3N(CH2CH3)2 |
500, 800 |
KBsphere® MSP |
30, 40, 50 |
-CH2SO3- |
500, 800 |
KBsphere® MCM |
30, 40, 50 |
-CH2COO- |
500, 800 |
KBsphere® MQ |
30, 40, 50 |
-CH2N+(CH3)3 |
500, 800 |
KBsphere® MDEAE |
30, 40, 50 |
-CH2N (CH2CH3)2 |
500, 800 |